MSI检测是怎么做的，一定要用肿瘤组织吗？
微卫星不稳定性（MSI）检测，如今已成为胃癌、结直肠癌、胰腺癌等消化道肿瘤诊疗中不可或缺的一环。它像一把精准的钥匙，能帮助判断患者是否适合接受免疫检查点抑制剂治疗，从而可能开启长期生存的大门。然而，很多患者和家属在面对这项检测时，心中都会浮现出两个最实际的问题：MSI检测是怎么做的，一定要用肿瘤组织吗？ 今天，我们就来彻底拆解这两个问题。
方法一：金标准——基于肿瘤组织的PCR+毛细管电泳法
谈到MSI检测是怎么做的，就不得不提被国际公认的“金标准”——聚合酶链式反应结合毛细管电泳法。这个方法听起来复杂，其实原理很直观。
整个过程始于一份关键的样本：经过福尔马林固定、石蜡包埋的肿瘤组织切片，也就是病理科常说的FFPE样本。检验人员会从这片组织里小心翼翼地提取出肿瘤细胞的DNA。接着，他们会用PCR技术，像一台高精度的复印机，把DNA上几个特定的“微卫星”位点（比如NR-27、BAT-25等，通常是5个位点）大量复制出来。
重头戏在下一步：毛细管电泳。扩增后的DNA片段被注入比头发丝还细的毛细管中，在电场作用下，不同长度的片段“跑”的速度不一样。最后，仪器会生成一张像山峰一样的电泳图。检验医师的工作，就是对比肿瘤组织和患者自身正常组织（通常取自手术切缘或血液）的电泳峰图。如果肿瘤组织的峰出现了明显的移位或增多，那就意味着在这个位点上，DNA复制出了错，也就是“不稳定”。当一定比例（如≥2个）的位点出现不稳定，就被判定为MSI-H（高度微卫星不稳定）。
这个方法之所以是金标准，就在于它经过了数十年的验证，结果稳定、可靠，是临床决策最坚实的依据。但它高度依赖一份质量过关的肿瘤组织样本。
方法二：高效全景扫描——基于肿瘤组织的二代测序（NGS）法
如果说PCR法是针对几个关键地点的“精准巡查”，那么二代测序技术就是一次“全景扫描”。NGS正在成为回答MSI检测是怎么做的这个问题时，越来越重要的答案。
NGS同样主要使用FFPE肿瘤组织样本。它的强大之处在于，可以一次性对几百甚至上千个基因（包含大量微卫星位点）进行测序。通过复杂的生物信息学算法，计算机会自动分析这些位点的变异情况，给出一个客观的MSI状态评分。
这种方法有几个突出的优点。第一是通量高，一次检测能获得海量信息。第二是客观，减少了人为判读的差异。最重要的是，它实现了“一石多鸟”。在做MSI检测的同时，患者还能知道自己有没有RAS、BRAF、HER2等其他重要的基因突变，这对于制定全面的治疗方案（比如靶向治疗）价值巨大。在消化道肿瘤中，尤其是晚期患者，这种多基因联检的策略正成为趋势。
当然，NGS对样本质量和肿瘤细胞含量的要求也更高，而且成本相对较高。但对于寻求最全面分子图谱的患者来说，它是一个极具价值的选择。
方法三：无创探索——液体活检与血液MSI检测
“医生，我父亲年纪大，取不到肿瘤组织，还能做MSI检测吗？” 这是门诊经常听到的疑问。这就引出了我们探讨的另一个核心：一定要用肿瘤组织吗？
不一定。液体活检技术的成熟，带来了新的可能。血液MSI检测，就是通过抽取一管外周血，来检测其中循环肿瘤DNA的微卫星状态。
原理是这样的：肿瘤细胞在生长或死亡时，会将其DNA碎片释放到血液中，这就是ctDNA。通过高深度的NGS技术，我们可以从血液中捕获这些微量的ctDNA，并对其中的微卫星位点进行分析，从而推断原发肿瘤的MSI状态。
这听起来很美好，但它有明确的适用场景和局限性。它非常适合那些组织样本无法获取（如深部肿瘤穿刺风险高）、或组织样本年代久远已耗尽的患者。它也用于治疗过程中的疗效动态监测和复发预警。
不过，目前血液检测的灵敏度仍是一个挑战。当肿瘤负荷较低、血液中ctDNA含量少时，可能会出现假阴性结果（即其实是MSI-H，但血检没查出来）。因此，国内外权威指南通常仍将组织检测作为首选和确诊依据，而将血液检测视为一种重要的补充手段。所以，血液可以做，但解读结果时需要更加谨慎，必要时仍需寻求组织验证。
样本选择面面观：肿瘤组织 vs. 血液，如何抉择？
面对两种样本，临床该如何选择？这需要权衡利弊。
高质量的肿瘤组织样本（尤其是新近获取的）无疑是“最优解”。它直接来源于肿瘤本身，信息最完整、准确度最高，是病理诊断和分子分型的基石。无论是PCR法还是NGS法，组织样本都能提供最可靠的结果。但它的缺点也很明显：有创、对于已失去手术机会或转移灶难穿刺的患者可及性差。
血液样本的优势在于无创、便捷、可重复动态采集。它反映的是全身肿瘤的“整体情况”，尤其能捕捉到不同转移灶释放的DNA，可能克服肿瘤异质性的问题。但其“短板”在于灵敏度，且价格不菲。
从临床实践出发，建议遵循一个基本原则：只要有可能，应优先使用手术或活检获取的肿瘤组织进行MSI检测。 当组织样本确实无法获得，或患者强烈拒绝有创操作时，可考虑采用经过严格验证的血液检测产品。如果血液检测结果为MSI-H，其指导用药的参考价值很高；但如果结果为MSS（微卫星稳定），则不能完全排除MSI-H的可能性，需结合临床其他指标综合判断。
总结与建议：为消化道肿瘤患者选择精准的MSI检测路径
回到最初的问题：MSI检测是怎么做的，一定要用肿瘤组织吗？ 现在我们可以清晰地看到，检测方法主要有基于组织的PCR/NGS法和基于血液的液体活检法。肿瘤组织是首选的、最可靠的样本，但血液检测为无法获取组织的患者提供了重要的补充路径。
对于胃癌、肠癌等消化道肿瘤患者，做出明智选择的关键在于充分沟通。患者和家属应该与主治医生（肿瘤科、胃肠外科医生）及检验科分子病理医生深入交流，明确几个要点：患者目前是否有可用的肿瘤组织样本？其质量如何？本次检测的主要目的是什么（是初诊分型，还是耐药后寻找新方案）？家庭的经济承受能力如何？
基于这些信息，可以制定个性化的检测策略。例如，初诊的晚期胃癌患者，若有新活检组织，采用NGS大Panel检测是获取全面信息的高效方式；而一位仅存多年前手术组织、且目前疑似复发的结直肠癌患者，或许“组织NGS复检”或“血液动态监测”会是更实际的考量。
最终，我们倡导所有符合条件的消化道肿瘤患者，都应积极了解并进行MSI等相关分子标志物检测。不要因为对“怎么做”、“用什么样本”的困惑而错过宝贵的治疗机会。主动与您的医疗团队探讨最适合您的检测方案，让精准医学的成果，真正为您点亮抗癌之路。
